1. 将使用的分析甲醇及水过滤，再将相应的通道放入瓶中。

2.依次打开电脑、泵和紫外检测电源；稳定后，打开在线软件（Versatiler），点击Enter，进入系统界面。

3. 将分离柱连接到仪器上。

4. 点击Method，首先将检测波长设为210nm，收集波长设为254nm，流速设为10~15，接样方式为Manual。①冲柱子：在方法栏EQ中设置起始和终止时甲醇比例均为100%，时间10~15 min，设置方法名称及保存路径，在最上方一列点击保存，点击右侧system，点击开始运行；②平衡体系：上步运行结束后，点击停止，更改EQ，甲醇比例为分离初始比例（一般为10%），平衡10 min；点击add设置分离方法，例如下表，并保存；进入system界面，点击开始；

③上样：平衡结束后，在system界面点击Load Sample， 将样品柱接到分离柱上，点击Run Gradient。

5. 在system界面可观察到样品的吸收及分离情况，并收集相应组分。

6. 方法运行结束后，点击停止，点击Report→view report，保存图片。

7. 异丙醇冲柱子：将甲醇通道置于已膜滤过的异丙醇中，Method同第4步中①。

8. 结束后，将两通道同时置于甲醇瓶中，设置方法为50%冲柱子10~15 min，进行通道中溶剂替换。

9. 实验结束后，关闭软件，然后依次关闭泵和紫外检测器的电源，最后将样品柱及分离柱卸下，将分离柱上下两端封住，保存时尽量保持竖直。