1.开机前准备
(1)先用薄层色谱法分析样品,获得合适的柱介质、分离样品的溶剂组成系统。
(2)根据要分离样品的量选择合适的柱子。
2. 分离与制备
(1)将合适的柱子安装在仪器中,选择method editor,在新窗口中输入柱子的大小、洗脱时间或洗脱柱体积、溶剂A和溶剂B的种类、洗脱梯度曲线、洗脱速度、试管容量和检测波长等设置,点击exit退出该界面。
(2)在主窗口中,点击play按钮。
(3)从最小运行条件窗后中,选择上样类型(liquid or solid),点击OK开始运行。
(4)系统首先平衡柱子。这段时间内,准备好样品。如果选择liquid选项,将样品以少量体积的溶剂溶解后注射;如果选择solid选项,按固体装填样品的方式进行装填。
(5)系统在执行完柱平衡后会暂停,并提醒用户装填样品。
(6)装完样品后,选择OK键开始运行。
(7)待样品纯化完毕后,根据屏幕上分离曲线对样品分开收取。
注意事项:所有的方法均应设置一高浓度的B溶剂冲洗柱子作为程序结束,一般须两到三个柱体积,残留化合物将会从柱子、流动池和内部管路中被清洗出来。